胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動(dòng)物的性別、年齡、生理條件和營(yíng)養條件不同而異。
血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細胞生長(cháng)或抑制生長(cháng)活性是達到生理平衡的。
胎牛血清保存及使用注意事項:
1、保存溫度
血清一般保存在-20℃以下保存,使用之前應放置2-8℃冰箱過(guò)夜溶解。使用建議1周-2周內用完,如用量小建議小包裝分裝凍存,以免反復凍融,血清失效。
2、是否要滅活
熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍血清。加熱過(guò)程中須規則搖晃均勻。此熱處理之目的是使血清中補體成份(complement)去活化。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為會(huì )造成沈淀物之顯著(zhù)增多,且會(huì )影響血清之品質(zhì)。
3、為何會(huì )有沉淀
凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中脂蛋白(lipoprotein)變性及解凍后胎牛血清中存在血纖維蛋白(fibrin)造成,這些凝絮沈淀物不會(huì )影響血清本身之品質(zhì)。
若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會(huì )阻塞過(guò)濾膜,并且會(huì )導致?tīng)I養流失,細胞狀態(tài)不好。